Die molekulare Diagnose entspricht einer Reihe molekularer Techniken, die darauf abzielen, Veränderungen in der DNA zu identifizieren, die beispielsweise auf genetische Krankheiten oder Krebs hinweisen könnten. Darüber hinaus werden häufig molekulare Techniken zur Identifizierung und Bestätigung von Infektionskrankheiten eingesetzt, da sie eine schnellere und genauere Diagnosemethode darstellen.
Die molekulare Diagnose ist teuer und wird daher von Ärzten nicht sehr häufig angefordert. Sie liefert jedoch genaue Ergebnisse hinsichtlich des Vorhandenseins der Veränderung, der Art und Weise, wie sie die Funktion des Organismus und die Reaktion des Patienten beeinträchtigen kann Behandlung.
Wofür ist es?
Die molekulare Diagnose kann mit mehreren Zielen durchgeführt werden. Die wichtigsten sind:
- Identifizierung von Leukämie- bedingten Mutationen, wie beispielsweise die Identifizierung der BCR-ABL-Translokation, die für chronische myeloische Leukämie (CML) charakteristisch ist, charakteristische Mutationen von hämatologischen Erkrankungen wie erblicher Hämochromatose, Polyzythämie vera, essentieller Thrombozythämie und Thrombophilie Molekulare Veränderungen, die auf das Auftreten von Krebs hinweisen, wie z. B. Darm-, Lungen-, Brust- und Gehirnkrebs, Diagnose von Infektionskrankheiten wie Hepatitis, Urethritis, Toxoplasmose, Leishmaniose usw. zusätzlich zur Identifizierung des HPV-Virus.
Obwohl die molekulare Diagnose im Vergleich zu anderen Diagnosetechniken als teuer angesehen wird, ist sie genauer, da sie die mit einer bestimmten Krankheit verbundene Veränderung und den Grad des Einflusses dieser Veränderung im Körper aufzeigt und so die Behandlung der Person unterstützt.
Molekulare Techniken werden nicht nur zur Diagnose verschiedener Krankheiten eingesetzt, sondern auch zur Beurteilung des Ansprechens auf die Behandlung, insbesondere bei Krebspatienten. Sie sind eine der wirksamsten Methoden, um das Fortschreiten und den Rückfall der Krankheit anzuzeigen.
Wie es gemacht wird
Die molekulare Diagnose kann mit jeder Probe durchgeführt werden, wobei der Arzt diejenige anfordert, die am besten Informationen über den Zustand des Patienten liefert. Dies kann Urin, Speichel oder in den meisten Fällen Blut sein. Es besteht keine Notwendigkeit zum Fasten oder zur Vorbereitung auf die Prüfung.
Die Probe wird gesammelt und zusammen mit der Anleitung des Arztes an das Labor geschickt, um die Untersuchung oder Art der durchzuführenden Forschung zu informieren. Die durchgeführte molekulare Technik hängt von der angeforderten Untersuchung ab und umfasst eine Reihe präziser Verfahren, mit denen das Vorhandensein oder Nichtvorhandensein der vom Arzt angeforderten Änderung festgestellt werden soll.
In der Regel wird nur eine geringe Menge der gesendeten Probe verwendet, der Rest wird gespeichert, damit die Prüfung bei Bedarf wiederholt wird.
Sehen Sie, was die wichtigsten molekularen Techniken sind
PCR
PCR, kurz für Polymerase Chain Reaction oder Polymerase Chain Reaction , ist eine molekulare Technik, die darin besteht, ein Fragment von genetischem Material, entweder DNA oder RNA, zu amplifizieren, um Mutationen zu identifizieren und damit bei der Diagnose von Krankheiten zu helfen.
Diese Technik wird aus der Extraktion und Reinigung des genetischen Materials hergestellt, das dann in eine Mischung gegeben wird, in der eine der Komponenten ein Restriktionsenzym ist, das gemäß der angeforderten Untersuchung variiert und dessen Funktion darin besteht, das Material in Fragmente zu schneiden damit die mögliche genetische Veränderung identifiziert werden kann. Die Mischung wird in einen Thermocycler gegeben, bei dem es sich um ein Gerät handelt, das durch die vom Fachmann gemäß der Untersuchung angegebene Temperaturschwankung wirkt und somit die Amplifikation des genetischen Fragments ermöglicht. Im Falle einer herkömmlichen PCR wird das PCR-Produkt nach der Amplifikation einer Elektrophorese unterzogen, bei der es sich um eine molekulare Technik handelt, die auf dem Gewicht und der Größe der Fragmente basiert, dh gemäß diesen Eigenschaften wird ein Bandenmuster erzeugt, dessen Analyse durchgeführt wird basierend auf der positiven Kontrollbande, dh der Bande, von der bekannt ist, dass sie der genetischen Veränderung entspricht.
Echtzeit-PCR, auch qPCR genannt, ist eine Art quantitativer PCR, die nicht nur die genetische Veränderung identifiziert, sondern auch Informationen zur Genexpression liefert, dh wie stark das veränderte Gen im Organismus exprimiert wird. Somit kann es verwendet werden, um die Diagnose zu unterstützen und die Behandlung zu überwachen. Die Echtzeit-PCR erfordert keine Elektrophorese, der gesamte Prozess der Amplifikation und Analyse von genetischem Material wird von einem Gerät durchgeführt und das Ergebnis wird von einem ausgebildeten medizinischen Fachpersonal interpretiert.
Sequenzierung
Die Sequenzierung ist eine molekulare Technik, die darin besteht, die Sequenz von DNA-Nukleotiden zu bestimmen, die die bildenden Einheiten des genetischen Materials bilden. Die Sequenzierung erfolgt aus einer PCR-ähnlichen Reaktion. In der Amplifikationsmischung werden jedoch modifizierte Nukleotide durch Zugabe von Fluorochromen hinzugefügt, wobei die modifizierten Nukleotide bei der Amplifikation des Materials in die DNA eingebaut werden und mehrere Fragmente erzeugen, die entsprechen dem Sequenzierungsprodukt.
Das Reaktionsprodukt wird in eine als DNA-Sequenzierer bezeichnete Vorrichtung gegeben, in der beim Erreichen der Fragmente durch den Laser des Geräts die Fluorochrome angeregt werden und Fluoreszenz emittieren, die vom Gerät mittels Peaks angezeigt wird, wobei jeder Peak entspricht zu einem Nukleotid. Am Ende der Reaktion informiert das Gerät die DNA-Sequenz und kann so den Arzt bei der Diagnose genetisch bedingter Krankheiten unterstützen.
